产品介绍

BCA 蛋白浓度测定试剂盒（BCA Protein Assay Kit）是根据目前世界上最常用蛋白浓度检测方法之一——BCA 法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，但本试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇（DTT）低于1mM，β-巯基乙醇（β-Mercaptoethanol）低于0.01%。

产品特色

· 方便快捷 标准品室温稳定，无需稀释，无需分装冻存；

· 线性相关好 标准曲线线性好，表现优于国内外同类产品；

· 设定合理 标准品设计浓度1 µg/µL，方便计算；设定线性范围25-1000 µg/mL，线性表现更优（非工作液实际检测范围）；

· 灵敏度高 检测浓度下限达25 µg/mL，最小检测限达到 0.5 µg；

兼容性好 可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的 Tween20、60、80。

操作步骤

1. 标准孔溶液配制： 取一块酶标板，按照下表加入试剂

2. 样本溶液稀释：估计待测样本浓度，做数个稀释，以保证待测孔蛋白含量落入标准曲线检测范围内。将待测样本原液（可选）和稀释后的样本加入空白孔中；

3. 工作液配制：根据标准孔的数量，按 50 体积 BCA 试剂 A 加 1 体积 BCA 试剂 B（50:1）配制适量 BCA 工作液，充分混匀后，每孔加入200 μL BCA 工作液；2. 样本溶液稀释：估计待测样本浓度，做数个稀释，以保证待测孔蛋白含量落入标准曲线检测范围内。将待测样本原液（可选）和稀释后的样本加入空白孔中；

4. 孵育、记录数据：轻晃酶标板20s，37℃或60℃放置 30 分钟后，测定562nm的吸光度值并记录；

5. 绘制标准曲线：以蛋白含量（μg）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线，检查R2值是否达到要求；

6. 计算样本蛋白含量：根据待测样本吸光度值计算样本孔蛋白含量（μg），除以样品稀释液总体积（20μL）， 乘以样品稀释倍数即为样品实际浓度（单位：μg / μL）。

保存条件

常温运输，避光保存，有效期2年。

注意事项

1. 建议每次测定时都做标准曲线。因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应的速度和温度有关，所 以除非精确控制显色反应的时间和温度，否则如需精确测定宜每次都做标准曲线；

2. 如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定， 但测定时，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积，样品和标准品的用量可相 应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少；

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；

4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用。

AP0011说明书（BCA蛋白定量试剂盒）.pdf